■本报记者 冯丽妃 练习生 宋书扉两个鼠爸也能生出一只鼠宝？这并非天方夜谭。1月29日，一项宣布于《细胞-干细胞》的研讨发布了这一迷信结果。中国迷信院植物研讨所研讨员周琪、李伟，副研讨员李治琨，以及中山年夜学教学骆不雅正等配合，应用胚胎干细胞工程技巧，胜利培养出只有两个鼠爸的小鼠，并且小鼠创记录地活到了成年。这项冲破性停顿一经宣布，就激发国际学术界的普遍存眷，被以为战胜了哺乳植物单性生殖中史无前例的困难。从弗成能到可能欢乐踱步的家鸡、气势压人的科莫多巨蜥、呱呱鸣叫的蛙类，这些人们熟知的植物都能孤雌生殖——在不爸爸的情形下孕育重生命。但在哺乳植物的天下里，孤雌生殖或单性生殖景象从未被察看到。哺乳植物遵守受精卵发育的法令：精子与卵子联合是弗成或缺的环节，爸爸跟妈妈一个都不克不及少。两枚精子或许两枚卵子可能出生重生命吗？迷信界一度以为这是弗成能的。从20世纪80年月起，迷信家就踏上了哺乳植物单性生殖研讨的征途。而最初的实验令人懊丧，只管他们可能培养出全母源胚胎，但一旦将其移植到母体子宫，就像被施了魔咒一样，无一破例地结束发育，终极胎逝世腹中。直到20世纪90年月初，迷信家才找到这一成绩的要害——印记基因。“一般基因同等表白怙恃两边的遗传信息，而印记基因却很‘率性’，只从父本或母本一方表白，另一方则冷静‘隐身’。”论文通信作者李伟对《中国迷信报》说。也就是说，印记基因凭仗奇特的表白方法，打开了单亲滋生的年夜门。迷信家盼望翻开这扇年夜门。2004年，日本东京农业年夜学的Tomohiro Kono团队经由过程精准修正要害印记基因H19的调控区，初次胜利培养出“双妈”小鼠。这些小鼠不只存活至成年，还展示了令人惊疑的特征——固然体重远低于畸形小鼠，但寿命长了28%。“双妈”鼠宝发育异样是什么惹起的？为揭开这一成绩的面纱，迷信界把眼光转向了孤雌生殖的对峙面——孤雄生殖。现实上，天然界的脊椎植物中至今未发明纯雄性滋生的实在事例，这使得孤雄生殖更像是存在于实践中的巧妙设想。“这背地有深档次的生物学起因。”论文第一兼通信作者李治琨向《中国迷信报》说明说，“卵子不只供给遗传物资，还在胚胎发育初期为其供给全部必须的物资——卵白质、RNA、初始细胞器等，这些庞杂的分子呆板是性命肇端的要害。而精子只是渺小的遗传信息载体，缺少‘启开工具’，无奈单独支持胚胎畸形发育。”2011年，美国得克萨斯年夜学研讨团队从雄性小鼠体内获取干细胞，在培育进程中使其局部丧失Y染色体酿成“雌性”干细胞，基于此培养出存在双父本遗传信息的小鼠。这证明了孤雄生殖的可能性，但并未处理更深层的遗传调控成绩。真正的冲破在2018年。周琪、李伟等中国迷信家不只发明出可能安康长年夜并繁殖后辈的“双妈”小鼠，还将小鼠精子注入去核卵细胞，发明出“纯雄性”受精卵，并初次出生了存活48小时的“双爸”鼠宝。这项研讨不只证明了孤雄生殖的可能性，更为印记基因编纂打开了新的篇章。但奇观背地，科研职员心中依然存在遗憾与迷惑：“双爸”小鼠的形状跟畸形小鼠一模一样，像一只奇异的“小海象”，体长只有约3厘米，身材胖乎乎的，四肢短小，浮肿重大，无奈畸形呼吸跟运动，短时光内就可怜逝世亡。这一成果再次证实，哺乳植物的孤雄生殖比孤雌生殖更难实现。但研讨团队并未就此止步。冲破“双爸”鼠宝的发育瓶颈“双爸”鼠宝发育缺点背地，有哪些未解之谜？研讨团队在寻根究底的进程中发明，多个印记基因与孤雄胚胎的发育成绩严密相干。特殊是当父源DNA异样二倍化时，这些印记基因地区就像绊脚石，妨碍胚胎的畸形发育。已知的这些印记地区包含Nespas、Igf2r、Kcnq1、Peg3、Snrpn跟Grb10等。犹如修补破坏的拼图一样，研讨团队在孤雄单倍体胚胎干细胞中逐个修复这些印记地区，再将经由基因编纂的胚胎干细胞与另一枚精子独特注入去核卵细胞。但是，即使如斯，“小海象”的呈现仍阐明孤雄胚胎的发育瓶颈未彻底冲破。研讨团队对孤雄小鼠停止懂得剖，成果令人震动。它们的水肿不只呈现在体表，还伸张到内脏器官，招致局部器官明显肿年夜，肝脏乃至比畸形小鼠年夜5倍。基于这一异样景象，他们提出了一个勇敢的假设：孤雄小鼠的逝世亡，或者是由于内脏器官适度收缩，压榨胸腔跟其余器官，影响了畸形的心理功效所致。基于这一假设，研讨团队决议停止第二轮基因编纂，目的不只是修复招致胚胎逝世亡的印记基因，还扩大到全部可能与胚胎适度成长相干的地区。经由先后五轮对19个差别印记区段停止基因编纂，他们终于看到了曙光：孤雄小鼠的体重逐步降落，内脏器官肿年夜跟水肿等异样症状开端缓解，终极约30%的孤雄小鼠胜利存活至成年。但是，这只是踢开了孤雄生殖途径上的一块绊脚石。要实现完全的孤雄生殖，另有一个主要挑衅——胎盘。因为孤雄胚胎无奈发育出畸形胎盘，他们就奇妙应用“四倍体弥补”技巧，为胚胎发育供给了所需的胎盘构造。经由过程进一步修复孤雄胎盘中一些印记基因的异样表白，他们终于胜利构建了携带20个印记区段基因编纂的孤雄单倍体胚胎干细胞，并将其与精子独特注入去核卵细胞，胜利转化为可存活的胎儿跟功效完全的胎盘。“采取这种方法构建的孤雄小鼠，与一般小鼠有明显差别。它们的体重增加敏捷，当一般小鼠体重到达20克时，孤雄小鼠体严重约为30克。孤雄小鼠还表示出更强的摸索欲，在旷场试验中频仍进入核心地区，这与啮齿类植物沿边沿运动的习惯天壤之别。”李治琨说。孤雌小鼠不只体重增加形式与孤雄小鼠相反，行动上也构成了赫然对照。在旷场试验中，孤雌小鼠多少乎老是沿着边沿运动，很少进入核心地区。这种孤雄与孤雌小鼠行动上的“镜像”景象，令人赞叹不已。别的，它们的寿命也有显明差别。孤雌小鼠寿命较长，而孤雄小鼠的寿命仅为一般小鼠的60%。据先容，试验室中，孤雄小鼠诞生后3至6个月为性成熟到丁壮，均匀寿命为354天，而一般小鼠寿命为589天。对孤雌跟孤雄小鼠的DNA甲基化检测发明，孤雌小鼠印记基因的甲基化特点与卵子的甲基化形式高度类似，而孤雄小鼠则更多保存了精子的甲基化特点。这一发明不只在年夜脑、小脑跟多种内脏器官的甲基化检测中失掉了验证，也为懂得它们在体重、行动跟寿命上的差别供给了新线索。这些差别很可动力于它们体内未完整修复的剩余基因印记。“这些发明供给了强无力的证据，标明印记异样是哺乳植物单性滋生的重要阻碍。”论文独特通信作者骆不雅正说，“这种方式能够明显改良胚胎干细胞跟克隆植物的发育成果，为再生医学开展开辟了一条充斥盼望的途径。”改写印记基因认知“双爸”小鼠研讨，为提醒印记基因在单性生殖阻碍中所表演的庞杂脚色供给了新视角。研讨标明，印记基因的演变目的并非直接禁止单性生殖，而是与单性生殖存在直接接洽，可调控胚胎发育进程中的资本调配跟空间顺应，直接影响单性生殖的胜利率。李伟表现，“双爸”小鼠研讨标明，印记基因调控母源与父源基因的彼此感化，影响胚胎发育，直接决议了孤雄或孤雌小鼠的出生。“这一进程合乎经典的抵触假说——印记基因的演变跟生殖阻碍不直接关系，而是经由过程调控胚胎在母体子宫内的发育，辅助胎儿顺应无限空间。”他说，“母源印记基因偏向于‘缩小’胎儿体积，以顺应无限的子宫空间；父源印记基因则经由过程‘增年夜’胎儿体积，进步后辈生活概率。”“孤雄与孤雌小鼠在体重、行动跟寿命上的镜像差别，恰是怙恃基因博弈的副产物。”李伟弥补说，这也为摸索基因与情况顺应的庞杂关联供给了可贵线索。李治琨也表现，当体内有两套父本DNA时，胚胎每每会适度成长，这种生物学上的弗成连续性终极会影响其存活。这些独自的异样并不致命，且一旦失掉修复，就可能发生可存活的集体。这些都标明，印记基因并非直接禁止单性生殖。不外，研讨职员指出，这项研讨仍面对诸多挑衅。比方，现在仅11.8%的“双爸”存活胚胎可能发育到诞生，并非全部幼崽都能存活至成年，而年夜少数活到成年的小鼠的寿命都收缩了，且是不育的。“仍须要经由过程进一步优化印记基因的润饰计划，培养出更安康的孤雄小鼠，终极为印记相干疾病带来新的医治战略。”李治琨说。下一步，该团队将持续研讨怎样经由过程润饰印记基因发生存在更高发育潜能的胚胎。他们还打算将这些在小鼠中开辟的试验方式扩大到山公等更年夜的植物模子中。不外，这须要相称多的时光跟尽力，由于山公的印记基因组合与小鼠的有很年夜差别。值得留神的是，固然该技巧展现了宏大潜力，但在利用于人类之前还需战胜很多伦理跟技巧成绩。以后，国际干细胞研讨学会的伦理指南制止将此类技巧用于人类生殖目标，以为其保险性尚未失掉充足验证。跟着技巧的提高，将来某一天或无望实现相干医学利用。相干论文信息：http://doi.org/10.1016/j.stem.2025.01.005